E.coli DNA连接酶

E.coli DNA连接酶
产品描述

E.coli DNA是一种催化双链 DNA的 5'-磷酸和 3'-羟基形成磷酸二酯键的NAD+ 依赖性连接酶。该酶易催化双链DNA粘性末端的连接,也可作用于有缺口的DNA末端。在高浓度PEG或Ficoll®等试剂作用下,也可连接DNA的平滑末端。随酶提供10X反应缓冲液。
 
名称 Cat# 大小 浓度 价格 数量
E.coli DNA ligase
EDLA-100
1,000 units
10,000 U/ml
1,165.00
E.coli DNA ligase
EDLA-200
4,000 units
10,000 U/ml
3,990.00
E.coli DNA ligase
EDLA-OEM
Any Size
询价
10x E. coli DNA Ligase Reaction Buffer
B-ED10
50ml
310.00

制品说明:
E. coli DNA连接酶是一种催化双链 DNA的5’-P和3’-OH形成磷酸二酯键的NAD+依赖性连接酶。该酶易催化双链DNA粘性末端的连接,也可作用于有缺口的DNA末端。在高浓度PEG或Ficoll等试剂作用下,也可连接DNA的平滑末端。随酶提供10X反应缓冲液。

用途:
·      dsDNA切刻修复
·      Okayama Berg cDNA克隆

来源:
含有E. coli DNA连接酶过表达克隆的E. coli菌株。

浓度(比活):
6000 U/mg

单位定义:
1单位E. coli DNA连接酶是指在16℃,标准实验条件下,30分钟内能使至少50%的经HindIII消化的λDNA片段 [5’端浓度为0.12 μM,300 μg/ml] 连接所需的酶量。

反应条件:
1X E. coli DNA 连接反应缓冲液
16℃孵育

10X E. coli DNA连接反应缓冲液:
30 mM Tris-HCl,4 mM MgCl 2,26 μM NAD,1 mM DTT,50 μg/ml BSA,25癈 环境下,pH为 8.0。

操作步骤:
离心管中加入下列试剂并混匀;


试剂

试剂量

DNA

5 μg

10X E. coli DNA 连接反应缓冲液

2 μl

E. coli DNA连接酶

2.5 μl(10U)

ddH2O

加至终体积为 20 μl

2.     16℃孵育分钟;
3.     65℃孵育20分钟使酶失活终止反应。

储存条件:-20℃保存

 参考文献:
1. Zimmerman, S. B. and Pheifer, B. H. (1983) Proc. Natl. Acad. Sci., USA 80, 5852-5856.
2. Okayama, H. and Berg, P. (1982) Mol. Cell. Biol. 2, 161-170.

该产品仅限于实验科学研究用,若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途。

Manual & Protocols



MSDS & Certificates

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Protein G,Agarose
Puramag™质粒 DNA纯化试剂盒
Pst I
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¥3,175.00
¥635.00
¥245.00
 
Protein G (异硫氰酸荧光素,FITC)
50% Triton x-114
Csp68KVI
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¥1,730.00
¥245.00
 
蛋白质Ladder(10 – 99kDa)
50% CA-630 聚乙二醇苯基醚(IGEPAL)(NP-40)
Protein G,碱性磷酸酶(AP) 标记
蛋白质Ladder(10 – 99kDa) 50% CA-630 聚乙二醇苯基醚(IGEPAL)(NP-40) Protein G,碱性磷酸酶(AP) 标记
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