T4核酸内切酶 VII

T4核酸内切酶 VII
产品描述

T4核酸内切酶VII是一种DNA连接特异性核酸内切酶(也称作解离酶或水解酶)。T4核酸内切酶 VII可在体内降解新合成DNA的分支DNA结构,也可识别错误的碱基配对,碱基插入,切除loops、gaps、脱嘌呤/脱嘧啶位点,在DNA链对应位点形成切口。
 
名称 Cat# 大小 浓度 价格 数量
T4核酸内切酶 VII
ENDO7-100
2,500 U
10,000 U/ml
2,205.00
T4核酸内切酶 VII
ENDO7-200
10,000 U
10,000 U/ml
6,615.00
T4核酸内切酶 VII
ENDO7-OEM
询价

制品说明:
核酸内切酶VII是噬菌体T4的基因49的产品,分子量为18 kDa。T4核酸内切酶VII参与DNA包装、体内基因组重组和错配修复。已有体外实验证明,T4核酸内切酶VII亦可降解错配的单碱基、异源双链loop环和分支DNA,如四链的Holliday 结构和三链的Y型结构。

来源:
含T4 核酸内切酶VII基因过表达克隆的重组E.coli菌株。

单位定义:
1 单位(0.5ng) 指37℃ 、30 分钟内,在含有50mM Tris-HCl( pH 8.0), 10mM MgCl2, 10mM β-ME和 0.1 μg/μl BSA的缓冲液条件下,使1 pmol FAM标记的28 mer 寡核苷酸的四链Holliday结构的底物降解50%。

酶活:2000 U/μg

实验数据:
T4 Endonuclease VII

图1:毛细管电泳分析MCLAB T4核酸内切酶VII结果。(a) 阴性对照结果分析:10 pmol FAM标记的28mer寡核苷酸底物。(b)在50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 10 mM MgCl2, 10 mM β-ME 和0.1 μg/μl BSA环境中,37℃条件下,30分钟内,40U MCLAB T4核酸内切酶VII可完全降解10 pmol FAM标记的28mer寡核苷酸的四链Holliday结构的底物

T4 Endonuclease VII
图2:MC LAB T4核酸内切酶VII和T7核酸内切酶I(其他品牌)活性比较。二者相比,30分钟内,MCLAB T4核酸内切酶VII用量更少,效率更高。
(a) 在50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 10 mM MgCl2, 10 mM β-ME 和0.1 μg/μl BSA环境中,37℃条件下,30分钟内,10 U(275 fmol) MCLAB T4核酸内切酶VII作用10 pmol FAM标记的28mer寡核苷酸的四链Holliday结构的底物(酶与底物摩尔比1:70),可降解64%。 (b) 在50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl,(pH 7.9), 10 mM MgCl2, 1 mM DTT环境中,37℃条件下,30分钟内,40 U (368 fmol) T7核酸内切酶I(其他品牌)作用10 pmol 四链Holliday结构的底物(酶与底物摩尔比1:50),仅可降解43%。

表:T4 核酸内切酶 VIIT7 核酸内切酶 I进行比较

 

T4 核酸内切酶 VII

T7 核酸内切酶 I

酶蛋白分子量

18 KDa

60 kDa

功能

溶解酶

溶解酶

应用

酶突变检测技术(EMD)
降解分支DNA
检测或切割异源双链

酶突变检测技术(EMD)
降解分支DNA
检测或切割异源双链

来源

噬菌体T4

噬菌体 T7

蛋白设计

T4核酸内切酶 VII

麦芽糖结合蛋白(MBP)和T7核酸内切酶I 的融合蛋白

酶活
(四链Holliday 结构作用30分钟

*
10单位的酶(275 fmol蛋白,酶与底物摩尔比1:70)降解四链Holliday 结构64%。

*
40单位的酶(368 fmol蛋白,酶与底物摩尔比1:50)降解四链Holliday 结构43%。

特异性

高*(单分辨峰)
(single resolved peak shown on CE)

低*(有非特异性峰)
(multiple resolved peaks shown on CE)

* 见图2比较结果。

酶储存液:
10 mM Tris-HCl、50 mM KCl 、1 mM DTT、0.1 mM EDTA 、50% 甘油 , 25°C条件下,pH 7.4 。

随酶提供:
10x T4 Endonuclease VII Reaction Buffer

10x T4 Endonuclease VII Reaction Buffer:
500 mM Tris-HCl 、100 mM MgCl2、100 mM β-ME、1 mg/ml BSA,25°C条件下,pH 8.0。

储存条件:-20℃保存

参考文献:
1. Golz, S., Birkenbihl, R. P., and Kemper, B. (1995), DNA Research 2, 277-284.

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