Tn5转座酶

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MCLAB的Tn5转座酶是一种Tn5转座酶突变体的酶。这种酶可使Tn5转座子在体外随机插入靶DNA。

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Description

制品说明:

MCLAB的Tn5转座酶是一种Tn5转座酶突变体的酶。这种酶可使Tn5转座子在体外随机插入靶DNA。有效的转座反应需要在Tn5转座子的每一端都存在一个特定的19bp转座酶识别序列(Mosaic End或ME序列)。

Tn5转座酶催化反应过程涉及多步“剪切和粘贴”机制。最初,该酶与转座子的19bp ME结合,形成一种称为转座子的复合物。随后,转座子对靶DNA的磷酸二酯骨架随机切割。最后,Tn5转座酶催化转座子3′-OH末端与靶DNA暴露的5′-磷酸化末端进行共价连接。该转座反应使得转座子插入位点的侧翼产生9-bp的重复序列。

应用:

  • 体外转基因实验
  • 二代测序随机文库构建
  • 将标记物(如T7启动子或R6Kγ复制起点)插入任何所需的靶DNA中
  • 将Tn5转座子19 bp ME的一端或两端插入的任意DNA片段插入到靶DNA中
  • 制备不含Mg2+的转座子,用于电击法将转座子随机插入细菌染色体

来源:

从携带Tn5基因的重组 E. coli 菌株中纯化。

MCLAB # 组分名称 浓度 储存条件 数量
TN5-100
Tn5 Transposase 1 U/µL -20°C 100 µL 
5X Tn5 Reaction Buffer 5X -20°C 1x1ml
10X Tn5 Stop Solution 10X -20°C 1x1ml
TN5-500
Tn5 Transposase 1 U/µL -20°C 500 µL
5X Tn5 Reaction Buffer 5X -20°C 1x1ml
10X Tn5 Stop Solution 10X -20°C 1x1ml

单位定义:

一个酶单位是指在37°C下,一个单位的Tn5转座酶催化1小时,琼脂糖凝胶电泳测定,产出1μg转座DNA释放的供体骨架片段。

随酶提供:

5X Tn5 转座酶反应缓冲液
10X Tn5终止液

5X Tn5 Transposase Reaction Buffer
0.5 M Tris-Ac(pH 7.5)
1.5 M KAc
100 mM MgAc2
40 mM 亚精胺

10X Tn5 Stop Solution
1% SDS

酶储存液:

酶储存液:
50% 甘油
50 mM Tris-HCl (pH 7.5)
100 mM NaCl
0.1 mM EDTA
0.1% Triton® X-100 (Rohm & Haas)
1 mM 二硫苏糖醇

储存条件: -20°C, 避免反复冻融。

该产品仅限于实验科学研究用,若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途,本公司概不承担任何责任。

Additional information

Option

100µL (10 pmol/μl), 500µL (10 pmol/μl)

Manual & Protocols

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