T4 RNA连接酶1（单链RNA连接酶）

Description

制品说明:

T4 RNA连接酶1 可催化ATP水解为AMP和PPi，并利用该反应释放的能量催化 3’→5′ 磷酸二酯键的形成，使核苷酸的5′ -P末端和 3′-OH末端连接。作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸盐。

应用:

• 用5′-[³²P] pCp进行RNA 3’末端标记
• RNA和DNA分子内或分子间连接
• 单链寡脱氧核糖核苷酸的合成
• 蛋白质中掺入非天然氨基酸
• ssRNA和DNA连接

来源:
携带 T4 RNA 连接酶1基因的重组E. coli 菌株。

1x T4 RNA Ligase Reaction Buffer (and 10mM ATP):
50 mM Tris-HCl
10 mM MgCl₂
1 mM DTT
pH 7.5 @ 25℃

热失活:

65℃孵育15分钟，煮沸2分钟。

反应条件:

1x T4 RNA连接酶反应缓冲液，补充1 mM ATP，在37°C下孵育。

单位定义:

1 单位指 37℃ 条件下, 30 分钟内将 1 nmol 的 5’-[³²P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量。

单位测定条件:
1x T4 RNA Ligase reaction buffer, supplemented with 1 mM ATP, is mixed with the RNA substrate (10µM of 5′-[³²P]rA16 ) and varying amounts of enzyme. Incubation is at 37°C for 15 minutes.

浓度: 20,000 units/ml

比活度: 168,000 U/mg

酶储存液:
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
50% 甘油
pH 7.5 @ 25℃

储存条件: -20°C

该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承担任何责任。

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Manual & Protocols