RCA DNA 扩增试剂盒

¥0.00¥2,677.00

RCA DNA扩增试剂盒是专门用于DNA测序模板制备的新产品。RCA(rolling circle amplification)方法利用噬菌体Phi29 DNA聚合酶滚环复制性质,指数扩增单链或双链环状DNA模板。该等温扩增方法可在数小时内将DNA的量由原始的沙克级扩增到微克级。
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PPK-100 100 reactions ¥714.00
PPK-200 500 reactions ¥2,677.00
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Description

制品说明:
RCA DNA扩增试剂盒是专门用于DNA测序模板制备的新产品。如图1所示,RCA(rolling circle amplification)方法利用噬菌体Phi29 DNA聚合酶滚环复制性质,指数扩增单链或双链环状DNA模板 (1, 2)。该等温扩增方法可在数小时内将DNA的量由原始的沙克级扩增到微克级。

微量传统的质粒或M13噬菌体DNA模板体外扩增,可不必再进行细胞过夜培养、质粒提取及纯化工作。Phi29 DNA聚合酶的校对活性使DNA复制的高保真性大大增强(3)

初始扩增模板可以是菌液、单克隆(平板)、质粒、M13噬菌体及任何环状DNA样本。可将琼脂糖培养皿挑取单个细菌克隆,直接加到RCA反应液中,或者取数微升菌液或甘油菌加入RCA反应液中,30℃恒温温育4-18个小时。RCA反应产物为高分子量的双链环状多联体。

注意:如果模板是M13克隆,RCA产物是双链DNA且即可用正向引物又可用反向引物测序。用RCA方法进行DNA扩增,产物不需要纯化即可直接用于测序。

产品特点

图1:RCA过程的示意图。六聚体随机引物与环状DNA模板多个位点结合。Phi29 DNA聚合酶可延伸每一条结合的引物。当Phi29 DNA聚合酶延伸到下游一引物,则发生链置换。被置换的单链被释放出来并和其他引物退火结合,继续进行链置换。此过程是连续的、产物成指数增长并且是恒温扩增。


图 2.
组分:

RCA DNA Amplification Kit (100 reactions)
Cat #: PPK-100
Phi29 DNA Polymerase, 100µl, (10,000 units/ml)
2x MCRCA mix, 1 ml
Cell Lysis Buffer, 1 ml

RCA DNA Amplification Kit (500 reactions)
Cat #: PPK-200
Phi29 DNA Polymerase, 500µl, (10,000 units/ml)
2x MCRCA mix, 5 ml
Cell Lysis Buffer, 5 ml

参考文献:
1. Dean, F. et al., Genome Research 11, 1095–1099 (2001).
2. Lizardi, P. et al., Nat. Genet. 19, 225–232 (1998).
3. Estaban, J. A. et al., J. Biol. Chem. 268, 2719–2726 (1993).

该产品仅限于实验科学研究用,若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途,本公司概不承担任何责任。

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