DNA同源聚合物Tailing Super-Mix试剂盒

描述

制品说明： 

DNA同聚物加尾SuperMix提供的试剂，可以在DNA 3‘末端经末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）的作用下添加同聚物尾巴。在理想的实验条件下，大约可在目标底物上加入30~70nt oligo（dA）和oligo（dT）或15~45nt oligo（dC）和oligo（dG）。

TdT是温度依赖性DNA聚合酶，可催化脱氧核苷酸不断的加入DNA分子的3’羟基末端。该酶由携带定点突变的小牛胸腺TdT基因的大肠杆菌中提取。凸末端、凹末端或平末端的单链或双链DNA分子都可作为TdT的底物。DNA 3‘凸出末端添加dNTPs的效率远高于3’平末端或凹末端。TdT与dATP和dTTP结合的效率远高于和dCTP和dGTP结合的概率。Co2+离子的加入可以促进DNA 3’末端加尾反应，对核糖核酸和修饰的核苷酸同样适用（例如，荧光标记，生物素标记，氨基烯丙基标记的核酸和双脱氧核酸）。

Figures:

图1：用3730 xl DNA Analyzer进行片段分析，结果显示，使用DNA同聚物加尾SuperMix试剂盒成功的在5’端用荧光素酶标记的单链DNA片段末端加入oligo（dA）尾巴。

箭头：加尾反应终产物。A：37℃作用15分钟，可在末端加入平均长度50nt 同聚物尾巴A。B：37℃作用30分钟，可在末端加入平均长度为65nt 的同聚物尾巴A。

图2：用3730 xl DNA Analyzer进行片段分析，结果显示，使用DNA同聚物加尾SuperMix试剂盒成功的在5’端用荧光素酶标记的单链DNA片段末端加入oligo（dC）尾巴。

箭头：加尾反应终产物。A：37℃作用20分钟，可在末端加入平均长度38nt 同聚物尾巴C。B：37℃作用40分钟，可在末端加入平均长度为45nt 的同聚物尾巴C。

组份列表:

DNA同聚物加尾反应SuperMix试剂盒以2X浓缩液的形式提供，以便在反应液中可加入终体积50%的底物。试剂盒中的试剂可供20或100次10μL体系的加尾反应。

DNA同聚物加尾反应SuperMix 20-rxn规格:
Tailing Enzyme 10ul supplied with 2x:
NGMA-100: Master Mix (dA) 100µL
NGMT-100: Master Mix (dT) 100µL
NGMC-100: Master Mix (dC) 100µL
NGMG-100: Master Mix (dG) 100µL

DNA同聚物加尾反应SuperMix 100-rxn规格:
Tailing Enzyme 50ul supplied with 2x:
NGMA-200: Master Mix (dA) 500µL
NGMT-200: Master Mix (dT) 500µL
NGMC-200: Master Mix (dC) 500µL
NGMG-200: Master Mix (dG) 500µL

组份:

末端脱氧核苷酸转移酶、NaCl，KAc，Tris-Ac，Mg-Ac₂，CoCl₂(II)，稳定剂，A、T、C、G四种脱氧核苷酸的其中一种。

储存条件：-20℃避光保存

参考文献:
1. F. J. Bollum, Terminal deoxynucleotidyl transferase, The Enzymes, the third edition (Boyer, P.D., ed.3, Academic Press, New York, vol.10, 1974) pp. 145-171.
2. G. R. Deng, R. Wu, Terminal transferase: Use in the tailing of DNA and for in vitro mutagenesis. Meth. Enzymol. 100, 96-116 (1983).

该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承担任何责任。

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