I-5™ Hi-Fi DNA 聚合酶

Description

制品说明：
I-5高保真DNA聚合酶是一种超快速、高保真的DNA聚合酶。该酶合成DNA的速度和准确度是以往任何单一酶都难以实现的，即使是复杂的模板，也能准确快速完成反应，依赖于模板类型，扩增速率为1kb/5-10秒，比Pfu快，大大节省PCR时间，且保真性远远高于Taq酶或Pfu。它可扩增多种类型的DNA模板，包括质粒、BACS、基因组DNA、λDNA等。可扩增8kb的基因组DNA和21kb的λDNA。

产品优势：
• 稳定性强，需要酶量少
• 保真度高，比Taq高50倍
• 快速高效，扩增速率比Pfu快10倍
• 高产
• 多功能，可对困难模板（包含长片段）进行扩增

来源：
含有I-5TM Hi-Fi DNA聚合酶基因的 E. coli 菌株。

应用：
PCR
克隆
困难模板扩增
高通量 PCR

随酶提供：
5X Reaction Buffer (1ml), 50mM MgCl₂ (1ml)

酶储存液：
20mM Tris-HCl, 100mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 200ug/ml BSA, 50% 甘油, 1X 稳定剂, pH 7.4 @ 25 C

储存条件：
-20℃保存

单位定义：
1单位是指在72℃，标准实验条件下，15分钟内能催化5 nmol 的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

参考文献
Frey, B. and Suppman, B. (1995). BioChemica. 2, 34-35.
Chester, N. and Marshak, D.R. (1993). Analytical Biochemistry. 209, 284-290.

运输条件：
干冰运输

实验数据：

I5（MCLAB）、KAPA（Roche）和Q5（NEB）的高保真DNA聚合酶比较：

DNA聚合酶保真度通过错误率来估计，即每个PCR循环的碱基取代百分比（复制效率为2.0）。Sanger测序和下一代测序（Illumina_MiSeq）应用中，DNA聚合酶I5（MCLAB）、KAPA（Roche）和Q5（NEB）的错误率比较（表1）。

结论：:

MCLAB的I5 DNA聚合酶的保真度是超高的。在Sanger测序和NGS_Illumina实验中，每100000bp有1.25个错误，完全可替代KAPA和Q5。

方法:

在该测定中，与I5、KAPA或Q5 DNA聚合酶比较，来确定I5保真度。通过Sanger测序（图1）和NGS_Illumina（图2），同时对2000bp的模板进行35个循环的PCR扩增，确定PCR错误率。原始数据通过以下方程进行归一化：

e = (f⋅2) / n

其中f是在PCR之后测量的误差的百分比，n是实际PCR循环的数量。

图1：通过Sanger测序法估算聚合酶保真度。

图2:通过下一代测序（Illumina_MiSeq）估算聚合酶保真度。

该产品仅限于实验科学研究用，若有任何单位或个人将该产品用于临床诊断、治疗等其他国家专门规定的特殊用途，本公司概不承担任何责任。

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