无机焦磷酸酶(酵母)

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无机焦磷酸酶(PPase)可使无机焦磷酸水解生成正磷酸盐。

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Description

制品说明: 

无机焦磷酸酶(PPase)可使无机焦磷酸水解生成正磷酸盐。该酶需要二价金属阳离子辅助,其中Mg2+活性最高。

应用:

  • 体外转录高产合成RNA(1,2)
  • DNA聚合反应过程中,防止焦磷酸盐的聚积(3,4)
  • 通过焦磷酸盐检测的方法,去除SNP基因分型反应溶液中PPi 污染物(5)

来源:

携带有从酿酒酵母(Sacharomyces cerevisiae)克隆的ppa 基因的重组E. coli 菌株。

单位定义:

一个单位是在标准反应条件下[0.5 ml 反应体系(100 mM Tris-HCL、[pH 7.2]、2 mM MgCl2 和2 mM PPi中),于25℃反应 10 分钟],每分钟催化从无机焦磷酸盐生成1μmol 磷酸盐的酶量。

酶储存液:

20 mM Tris-HCl

100 mM KCl

1 mM DTT

0.1 mM EDTA

50% 甘油

pH 8.0 @ 25℃

储存条件: -20℃

参考文献:

  1. Cooperman, B.S., The mechanism of action of yeast inorganic pyrophosphatase, Meth. Enzymol., 87, 526-548, 1982.
  2. Cunningham, P.R. and Ofengand, J., Use of inorganic pyrophostase to improve the yield of in vitro transcription reactions catalyzed by T7 RNA polymerase, Biotechniques, 9, 713-714, 1990.
  3. Tabor, S., Richardson, C.C., DNA sequence analysis with a modified bacteriophage T7 DNA polymerase. Effect of pyrophosphorolysis and metal ions, J. Biol. Chem., 265, 8322-8328, 1990.
  4. Dean, B.F., et al., Rapid amplification of plasmid and phage DNA using phi29 DNA polymerase and multiply-primed Rolling Circle amplification, Genome Res., 11, 1095-1099, 2001.
  5. Zhou, G.H., et al., Quantitative detection of single nucleotide polymorphisms for a pooled sample by a bioluminometric assay coupled with modified primer extension reactions (BAMPER), Nucleic Acids Res., 29, E93, 2001.

 

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